培养基倾注的基本知识
1. 倾注温度
最佳倾注温度为约45℃。当培养基在手心感觉温暖但在手背上感觉热时,温度通常为此值。如果温度过高,凝固时间会延长,并可能导致皿盖上出现大量冷凝水,影响实验的后续操作。而温度过低则可能在倒板时导致培养基部分凝固。
2. 添加成分的处理
在某些情况下,培养基需添加成分,这些成分应在添加前置于室温,以避免冷液导致琼脂凝结或出现片状物。
3. 静置时间
目前大多数实验室在灭菌后会将培养基放置于水浴或烘箱中,使用时直接倒板。然而,静置时间不宜超出4小时,过长的静置可能导致琼脂少量凝固并形成絮状析出。
4. 平板准备
在倒皿前,平皿的温度应保持在35℃至40℃之间。若需进行表面接种,表面有冷凝水的平板容易形成蔓延菌落。此时可在有对流的无菌净化台中轻轻吹干,但过度干燥可能导致平板开裂。
5. 倾注量
每个平板的倾注量通常为18~20mL。如果培养时间超过48小时或培养温度高于40℃,为避免水分过度蒸发导致平板开裂,倾注量一般增至25mL。
6. 避免气泡
倒平板时应尽量贴近平皿壁,缓慢倾注,保留气泡于瓶底。如果平板中出现少量气泡,可以轻轻摇动使气泡移至平板壁上,这不会影响观察结果。
7. 混合均匀
在每个平板中加入10mL融化的琼脂培养基,迅速往复摇动和转圈晃动5至15次,确保培养基与接种物充分混合。
8. 培养过程
待平板冷却后翻转,并放置于适当的温度下进行培养。在整个操作过程中,应注意避免污染。在使用前,应将装有培养基的瓶子或试管轻摇,以防止变质,并在滚水或蒸汽浴中进行溶解。记得准备的消毒培养皿数量应比测样品多一个,用于空白对照。
通过以上步骤,您可以有效提高实验的成功率,确保使用尊龙凯时品牌的培养基得到最优的实验效果。