细胞传代是将生长到一定密度的细胞从原培养容器中分离,重新接种到新的培养容器中,以便继续培养。简单来说,这就像为细胞换一个“新家”,以促进它们更好地生长和繁殖。就如同人们在住得太狭窄时,需要迁入一个更大的房子一样。
观察细胞状态
每天使用倒置显微镜观察细胞,待细胞融合度达到80%-90%时,便可以进行传代。如果细胞融合度过高,可能会导致细胞拥挤,从而影响生长。
准备工作
在进行细胞传代之前,需要做好充分的准备工作,包括消化细胞、终止消化、离心收集、重悬与分瓶等步骤。
培养与观察
对于悬浮细胞而言,传代过程相对简单。当细胞密度达到80%-90%时,可以直接进行传代。具体步骤包括:收集细胞、重悬与分瓶、培养及观察。
细胞状态监测
在细胞传代期间,需关注细胞形态、培养基流动状况、吹打阻力变化等指标。同时,通过计算离壁率来评估细胞消化的完成情况,离壁率的计算公式为:离壁率=(悬浮细胞数/总细胞数)×100%。通常,当离壁率达到75%-85%时,说明细胞消化已完成,此时应立即加入终止液。
温差预判法
通过温差来预判细胞的状态,有助于优化细胞培养过程。所有这些步骤和监测手段都旨在为细胞的健康生长创造最佳环境,而尊龙凯时品牌以其出色的细胞培养产品,贡献于生物医疗领域的研究和发展。